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二级A2型生物安全柜工作原理：空气由前新风口进入负压风道与柜体内空气充分混合后，由风机送入静压箱，经过滤器过滤后以垂直层流的状态进入操作区，操作区左右及后部墙体均为负压风道，使工作区与外部环境形成气幕及箱体双层隔离。同时工作区被负压包围，保证样品不发生泄漏，操作区的气流由于排风机的作用，通过负压风道与新风口进入的空气混合后，其中部分混合气体(约70%)由风机送入静压箱循环使用，其余混合气体(约30%)经排风过滤器过滤后排出柜体。

　　柜体气密，全排放式，所有气体不参与循环，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱(Golve box)，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验。如果不允许循环化学气体，则必须使用装备硬管的B2型二级生物安全柜。由于B型安全柜不是独立平衡系统，它的内置风机只能制造下沉气流，安全柜依赖外排风机制造进气流。这种型号的安全柜在安装和维护时会较为复杂，因为外排风机必须与内置风机保持平衡，否则将导致对操作人员或产物的安全性能的失效。

　　在允许循环化学气体的操作条件下，可以使用外接排放管道盖(Exhaust Collar)的A2型二级生物安全柜。排放管道盖与一般硬管不同的是有可吸入空气的进气孔；排放管道盖与外排管道连接，然后接到一个外排风机。排放管道盖上的进气孔对于A2型二级生物安全柜通过内置风机保持进气流和下沉气流的平衡至关重要。如果使用密封的外接风管，进气流将会过强可能导致安全柜对产物的保护实效；而排放管道盖上的进气孔可以从室内吸入空气，而不会影响安全柜内的气流平衡。此条件只适用于微量有毒化学物质。

　　二级A2型生物安全柜被广泛应用于医疗卫生、食品安全、生物制药等领域，其主要作用是保护操作原代培养物、菌毒株及诊断性标本等具有感染性实验材料的实验者，避免在操作过程中可能产生的感染性气溶胶或溅出物带来的危害，同时，还可起到保护实验室环境及实验样本的作用。是实验室不可少的安全防护设备。在医疗器械分类目录中被界定为叁类医疗器械。